O agente quimioluminescente usado para luminescência é muito diferente!
October 23 , 2024
A tecnologia de imunoensaio por quimioluminescência é bem conhecida no campo do diagnóstico in vitro! Estes incluem quimioluminescência direta, eletroquimioluminescência, quimioluminescência enzimática, quimioluminescência indireta. Muitos tipos de luminescência usam agentes luminescentes que também são muito diferentes! 1. Éster de acridina
Quimiluminescência direta
O éster de acridina (AE) é um composto orgânico tricíclico suscetível à oxidação. Quando oxidado por H2O2 em condições alcalinas, emite luz com comprimento de onda de 470nm e possui alta eficiência luminosa. Seu produto excitado N-metilacridona é a luminita do sistema de reação de luminescência. É utilizado para a marcação de haptenos e proteínas ou anticorpos policlonais ou monoclonais.
É uma substância sintética, que não existe na natureza, portanto não há interferência de ruído de fundo; O éster de acridina é relativamente insensível a mudanças de pH e temperatura. Ao mesmo tempo, seu peso molecular é de apenas 481, o efeito de impedimento espacial é pequeno e a reação de oxidação não precisa de catalisador, desde que possa ser realizada em ambiente alcalino.
A luminescência reage rapidamente e tem um fundo baixo. Durante a reação de oxidação, o conjugado é decomposto, de modo que a luminescência do éster de acridina livre não é inibida e o reagente apresenta boa estabilidade. É uma excelente escolha de agente luminescente na indústria.
Terapridina rutênio [RU(bpy)3]2+ é um agente eletroquimioluminescente que oxida com a tripropilamina doadora de elétrons (TPA) na superfície do ânodo. Rotulagem direta de antígenos ou anticorpos.
A luminescência é caracterizada por uma emissão de luz estável de apenas 0,01 ms, atingindo um pico em 300 ms, e o ciclo de eletroquimioluminescência de centenas de milhares de ciclos por segundo melhora muito a sensibilidade da análise.
A marcação é estável e fácil de controlar, mas o campo elétrico requer uma célula de medição especial e leva de 40 a 60 segundos para limpar a célula de medição após cada medição para restaurar o eletrodo ao estado, o que é fácil de causar contaminação cruzada, afeta a precisão dos resultados e reduz a velocidade de análise.
3.Luminol e seus derivados
Quimiluminescência enzimática
Luminol (3-aminobenzoilhidrazida), isoluminol (4-aminobenzoilhidrazida) e seus derivados possuem propriedades quimioluminescentes.
Em solução neutra: geralmente presentes como íons dipolo (zwitterions).
Em solução alcalina: torna-se um ânion divalente, que pode ser oxidado por moléculas de oxigênio em um intermediário que pode produzir fenômeno de quimioluminescência.
Em oxidantes: o luminol é convertido para um estado excitado, que decai para o estado fundamental e fluoresce.
4. adamantano AMPPD
Quimiluminescência enzimática
Em geral, a estrutura do adamantano é muito estável, mas quando a fosfatase alcalina é encontrada, a fosfatase alcalina catalisará o adamantano para remover o grupo fosfato para formar um intermediário instável, que se decomporá automaticamente e produzirá um sinal de luz de 470nm, que pode durar por dezenas de minutos a várias horas.
5. Quimioluminescência fotoinduzida
peculiaridade
Tempo de reação curto: um padrão de reação homogêneo.
Alta sensibilidade: O processo de reação é amplificado passo a passo e a luminescência melhora rapidamente a sensibilidade.
Boa estabilidade: Todo o processo de geração, transferência e amplificação de energia (luz) é muito estável e não é facilmente afetado pelo pH, força iônica e temperatura.