Poclight: solução de detecção de hemoglobina glicada
1. O que é hemoglobina glicada?
Dados recentes mostram que existem atualmente cerca de 114 milhões de pacientes com diabetes e 500 milhões de pessoas com pré-diabetes na China. De acordo com as Diretrizes Chinesas de Prevenção e Tratamento do Diabetes Tipo 2 (edição de 2020), no diabetes tipo 2, o diagnóstico também requer testes de glicemia aleatória (RPG), glicemia de jejum (FPG) e teste de tolerância à glicose de 2 horas (OGTT) dos pacientes. 2h) e hemoglobina glicada (HbA1c). A hemoglobina glicada, composta por HbA1a, HbA1b e HbA1c, da qual a HbA1c representa cerca de 70%, é estruturalmente estável. Ao contrário do teste direto do nível de glicose com OGTT e FPG, a HbA1c é um produto de reação não enzimática formado lentamente pela combinação de glicose e hemoglobina, refletindo o nível médio de glicose no sangue nos últimos 2-3 meses.
2. Técnicas e Métodos de Teste para Glicação
Atualmente, os métodos de detecção de hemoglobina glicada utilizados na prática clínica enquadram-se principalmente em duas categorias baseadas em princípios: aqueles baseados em alterações de carga (métodos físicos) e aqueles baseados em diferenças estruturais (métodos químicos). Os métodos de detecção de HbA1c mais utilizados no mercado são o imunoensaio e a cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). HPLC é atualmente o método padrão reconhecido internacionalmente, mas é limitado por fatores como preços caros dos instrumentos, altos custos de manutenção, impacto significativo da eficiência da coluna nos resultados dos testes e interferência de variantes e derivados de hemoglobina (como hemoglobina glicada, hemoglobina acetilada, HbF) durante a co-eluição, o que dificultou até certo ponto a sua aplicação generalizada. O imunoensaio, usando HbA1c como antígeno, é baseado no princípio de reconhecimento antígeno-anticorpo e normalmente tem como alvo 4-8 resíduos de aminoácidos no terminal N da cadeia beta da hemoglobina glicada como locais de reconhecimento de anticorpos, detectando a "verdadeira" HbA1c definida pelo sistema de referência da IFCC, dividido principalmente em imunoturbidimetria, imunoaglutinação, quimioluminescência, etc. Em 2013, a pesquisa do College of American Pathologists (CAP) descobriu que 67% dos laboratórios de HbA1c usavam esse método, que agora se tornou o mainstream método de detecção.
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Metodologia |
Princípio |
Vantagens |
Desvantagens |
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Imunoturbidimetria |
Utilizando a imunoturbidimetria, a hemoglobina total é detectada pelo método colorimétrico da hemolisina e o conteúdo percentual de HbA1c é calculado. |
Fácil de operar, velocidade de detecção rápida, baixo custo, boa repetibilidade, alta recuperação, CV<2% |
Fraca capacidade de resistir à contaminação cruzada, pequena faixa linear, suscetível à interferência de HbF e hemoglobina anormal, baixa estabilidade dos resultados |
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Método de imunoaglutinação |
O método de imunoaglutinação utiliza partículas de látex sensibilizadas com anticorpos anti-HbA para se ligarem aos antígenos correspondentes, induzindo assim uma reação de aglutinação. O grau de aglutinação é medido pela determinação da absorbância, indicando diretamente o teor percentual de HbA1c na Hb total |
Velocidade de detecção rápida (dentro de 7 minutos), forte especificidade, evita efetivamente a interferência de hemoglobinas variantes. |
Operação complexa, suscetível a interferências, pouca capacidade de resistir à contaminação cruzada, menor precisão, com coeficiente de variação (CV) normalmente superior a 6%. |
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Quimiluminescência |
O método de imunoensaio por captura de íons utiliza o princípio da reação antígeno-anticorpo, juntamente com marcação fluorescente. Isto envolve a ligação de marcadores fluorescentes a complexos poliiônicos carregados negativamente, que são então adsorvidos em superfícies de fibras carregadas positivamente. Após uma série de etapas de lavagem completas, a alteração na intensidade da fluorescência é medida para calcular a concentração. |
Fácil de padronizar e repetir, alta sensibilidade e especificidade de detecção, alta taxa de recuperação e precisão, baixa taxa de contaminação cruzada, poucos fatores de influência. |
É necessário adquirir o analisador CLIA, que é caro e adequado para testes de amostras de alto volume. |
3. Poclight Biotech: solução quimioluminescente de quinta geração para detecção de glicação
A Poclight Biotech, fundada em 2019, dedica-se à área de testes rápidos com "quimioluminescência homogênea extremamente simples e rápida", contando com a plataforma "Transferência de energia por ressonância quimioluminescente (CRET)" para desenvolver produtos quimioluminescentes de quinta geração, resolvendo muitos problemas existentes na mais avançada quimiluminescência de partículas magnéticas no campo da detecção imunológica, preenchendo a lacuna doméstica.
① Poclight: Dispositivo Mini CLIA C5000
O analisador CLIA seco semiautomático C5000 é usado para testes. É um processo totalmente automatizado, desde a amostra até os resultados. O processo de operação é mais simplificado e vários projetos podem ser executados simultaneamente na máquina, reduzindo a probabilidade de erros. Ao mesmo tempo, o analisador CLIA seco semiautomático C5000 adota a tecnologia CRET, com um corpo compacto, fácil de mover, alta flexibilidade e tipos versáteis de amostras, incluindo sangue total, plasma, soro, urina, cabelo, etc. cobrem inflamação, miocárdio, função da tireoide, hormônios sexuais, hipertensão, metabolismo do açúcar, metabolismo ósseo, etc., com vários modos de teste, incluindo aleatório, lote e emergência.
② Reagentes Poclight
O primeiro reagente de imunoensaio de esferas liofilizadas do mundo tem vantagens como alta precisão, baixo custo, velocidade rápida e transporte conveniente, resolvendo os problemas dos reagentes de ensaio quimioluminescentes tradicionais que exigem transporte em cadeia de frio e armazenamento refrigerado, com uma vida útil curta. Os produtos secos CLIA glicados de HbA1c da Poclight obtiveram aprovação de registro com sucesso. Os reagentes podem ser armazenados de forma estável à temperatura ambiente sem exigir refrigeração da cadeia de frio e adotam um design de embalagem de dose única. Os projetos glicados da Poclight apresentam: são necessários apenas 5 µL de detecção de glicados, suportando testes de sangue periférico.
Resumo
Usando a tecnologia de quimioluminescência de dose única de quinta geração para detectar hemoglobina glicada, o instrumento não possui fluídica complexa, não possui custos adicionais de manutenção e realiza testes sob demanda. Este método de teste visa reduzir custos de teste, melhorar a eficiência e garantir a precisão e confiabilidade dos dados clínicos, tornando-o uma escolha sábia para detecção de hemoglobina glicada.
